エクソーム解析┃理研ジェネシス

特長

ゲノムのエクソン領域のみを濃縮してシーケンシングするため、シーケンスコストを大幅に低減。
Single Nucleotide Variation（SNV）、Short Insertion/Deletion(InDel)の探索と弊社が独自開発したシステムによるアノテーション付与。
遺伝性疾患からがん^※まで候補遺伝子の同定に有用。

【New】新たにTwist Bioscience社の試薬を使用したエクソーム解析サービスを開始致しました。詳細は、下記のエクソン領域濃縮キットTwist Exome部分をご参照ください。

理研ジェネシス Whole Exome Sequencingの強み

数万検体規模の調査・コホート研究に対応。
国内トップレベルの解析実績・大規模プロジェクトでの採用実績。
ゲノム解析の経験豊富なスタッフによる安心のサービスとサポート体制。
医薬品開発に対応した品質保証体制での実施。

解析概要

ゲノムからエクソン領域を濃縮し、次世代シーケンサー(NGS) により塩基配列を決定します。得られたリード配列を参照配列にマッピングした後、SNVを検出し、アノテーションの付与を行います。複数サンプルの場合はサンプル間比較用のリストを作成します。

エクソン領域濃縮キット

SureSelect All Exon

実績のあるAgilent technologies社のSureSelect All Exonを使用したサービスです。

パネル名	対応生物種	対象領域	デザインサイズ
SureSelect Human All Exon V6	ヒト	コーディング領域、miRNA、snoRNA、tRNA	60 Mb
SureSelect Human All Exon V6 + UTR	ヒト	V6の全対象領域、体質性疾患研究向けUTR領域	91 Mb
SureSelect Human All Exon V7	ヒト	コーディング領域	48.2 Mb
SureSelect Human All Exon V8	ヒト	コーディング領域、TERTプロモーター	41.6 Mb
SureSelect Mouse All Exon	マウス	コーディング領域	49.6 Mb

●上記以外の濃縮キットについてはご相談ください。

Twist Exome^NEW

Twist Bioscience社のエクソーム用パネルを使用したサービスです。最適化された高品質の二本鎖DNAプローブを使用することで、より均一なカバレッジを持つデータが取得でき、シーケンス効率の向上とコストの削減が可能になりました。

パネル名	対応生物種	対象領域	ターゲットサイズ
Human Core Exome	ヒト	コーディング領域（CCDSのコーディング領域を99%以上カバー）	33.2 Mb
Human Core Exome + RefSeq またはComprehensive Exome	ヒト	コーディング領域（CCDS、RefSeq、GENCODEのコーディング領域を99%以上カバー）	36.8 Mb

●上記以外のパネルおよび既成パネルのカスタマイズについてはご相談ください。

解析結果

リード配列を参照配列に対してマッピング^※1し、変異箇所(SNV^※1)を検出します。
検出されたSNVは、各種アノテーション^※2をつけてエクセル・マクロファイル^※3 とテキストファイルでご提出します。エクセル・マクロファイル上で、Compound Heterozygote（複合ヘテロ接合体）変異候補を抽出することも可能です（この機能をご使用いただくためには、トリオサンプルのデータが必要です）。

※1 マッピング結果、SNV、DepthはIntegrative Genomics Viewer(IGV)で閲覧することが可能です。
※2 検出されたSNVには次のようなアノテーションがつきます（Humanの場合）。
変異箇所、塩基、新規/既知、影響を与える遺伝子、遺伝子への影響、dbSNP ID、RefSeq ID、CCDS ID、
アレル頻度(gnomAD、1000 Genomes、HGVD、GEM-J WGA)、Conserved Elements、アミノ酸置換影響予測（SIFTなど）、Splice Site変異影響予測、Depth、クオリティ値、サンプルごとのジェノタイプデータなど。
※3 アノテーションは弊社オリジナルのエクセル・マクロ（AnnotationViewer）で観覧でき、IGVおよび外部データベースと連携するようになっています。

納品物

・解析報告書
・データHDD：リード情報（FASTQ）、マッピングデータ（BAM）、SNV/InDel検出データ（VCF）、
　SNV/InDelのアノテーションデータ（エクセル・マクロファイルとテキストファイル）

サンプル条件

エクソン領域濃縮キット	SureSelect All Exon	Twist Exome
サンプルの種類	精製ゲノムDNA	精製ゲノムDNA
DNA量	3 µg	0.3 µg
濃度	50 ng/µL以上	10 ng/µL以上
OD260/280	1.8以上	1.8以上
溶媒	1x TE	10 mM Tris-HCl (pH 8.0) またはNuclease-free水^※

※EDTAを含まないバッファーを溶媒としてご使用ください。
・サンプルの定量はQubitまたはPicoGreenを用いた方法を推奨しております。
・サンプルの電気泳動写真がお手元にある場合にはご提供をお願いします。

解析例

機種	NovaSeq 6000
Exon Capture方法	SureSelect Human All Exon V6
平均データ量/サンプル	約10 Gb
リード長	150 bp
シーケンス方法	Paired End/Multiplex
バイオインフォマティクス解析	SNVおよび一部のShort InDelの同定、各種アノテーション付与
納期	品質評価通過後、約2.5ヵ月^※

※ 同時に解析を行うサンプル数が多い場合には、別途お打ち合わせの上決定いたします。